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關(guān)于玉米原生質(zhì)體的提取

來源: 托普儀器網(wǎng)  類別:技術(shù)文章  更新時間:2020-04-03  閱讀

      一、酶解液的組成:
      1 纖維素酶0.7% 果膠酶0.5% 山梨醇14% 氯化鈣5mmol•L-1, pH5.8

      二、漂洗液的組成:
      山梨醇14%,硝酸鉀 1mmol•L-1, 磷酸二氫鉀0.2 mmol•L-1, 氯化鈣0.5 mmol•L-1,
硫酸銅0.01 µmol•L-1

      三、材料預(yù)處理:
      取黃化葉片,去中脈后放入25%的蔗糖溶液中處理15~20min,使其發(fā)生質(zhì)壁分離,然后用于酶解

      四、進行兩次酶解
      在第二次酶解結(jié)束后,將葉片取出放于漂洗液中漂洗抖動使原生質(zhì)體釋放出來,然后將漂洗液在 1500 rpm離心 5 min,沉淀即為原生質(zhì)體,實驗證明在離心力為2500rpm,時間5min時,原生質(zhì)體得到率最高。

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